多功能酶標(biāo)儀測(cè)定水果中的纖維素的目的:
1.纖維素是植物細(xì)胞壁的主要成分之一,纖維素含量的多少,關(guān)系到植物細(xì)胞機(jī)械組織發(fā)達(dá)與否。因而影響作物的抗倒伏,抗病蟲(chóng)害能力的強(qiáng)弱。測(cè)定糧食、蔬菜及纖維作物產(chǎn)品中纖維素含量是鑒定其品質(zhì)好壞的重要指標(biāo)。
2.熟悉多功能酶標(biāo)儀的操作方法。
3.根據(jù)水果所含的纖維素含量來(lái)合理的選擇日常所食水果。
纖維素(cellulose)為β——葡萄糖殘基組成的多糖,在酸性條件下加熱能分解成β——葡萄糖。β——葡萄糖在強(qiáng)酸作用下,可脫水生成β——糠醛類(lèi)化合物。β——糠醛類(lèi)化合物與蒽酮脫水縮合,生成黃色的糠醛衍生物。顏色的深淺可間接定量測(cè)定纖維素含量。
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備(以蘋(píng)果為例)
(1)樣品預(yù)處理:從樣品中用溶劑將纖維素溶解。
(2)儀器和試劑
1.主要儀器 恒溫水浴、冰罐、電爐、玻璃坩堝、漏斗、定時(shí)鐘、多功能酶標(biāo)儀等。
2.試 劑 60% H2SO4溶液、濃H2SO4。 2%蒽酮試劑:2g蒽酮溶解于100rnl乙酸乙酯中,貯置于棕色試劑瓶中。
3.纖維素標(biāo)準(zhǔn)液:準(zhǔn)確稱取100mg純纖維素,放入100ml量瓶中,將量瓶放入冰浴中,然后加冷的60%H2SO4 60— 70ml,在冷的條件下消化處理 20—30min,然后用60%H2SO4稀釋至刻度,搖勻。吸取此液5.0ml放入另一50ml量瓶中,將量瓶放入冰浴中,加蒸餾水稀釋刻度,則每毫升含100μg纖維素。
4.繪制纖維素標(biāo)準(zhǔn)曲線
5.以所測(cè)得的吸光度為縱坐標(biāo),以纖維素含量為橫坐標(biāo),繪制纖維素標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(5)樣品的測(cè)定